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利用微生物评价供试品祛痘功效

痤疮丙酸杆菌抑菌实验方案

【评价原理】

痤疮丙酸杆菌(Propionibacterium acnes),也称痤疮杆菌、疮疱丙酸杆菌,是造成青春痘的主要细菌。基因组研究显示该细菌的几个基因能够制造一些分解皮肤组织的酶和免疫原性的蛋白质。痤疮丙酸杆菌是皮肤上的优势菌群,栖居于毛囊、皮脂腺内,可从人的鼻咽、口腔、肠道和泌尿道中分离。而痤疮丙酸杆菌的大量增殖是引起痘痘形成和加重的重要因素之一。

利用抑菌剂不断溶解经琼脂扩散形成不同浓度梯度,以显示其抑菌作用。通过抑菌环大小以判断供试品是否具有抑菌能力。

【实验方法】

取空白无菌药敏纸片(或牛津杯),用无菌镊子蘸取待检少许样品于纸片上,涂抹均匀。取痤疮丙酸杆菌菌悬液100 uL(5×10^5 ~ 5×10^6 CFU/mL)在BHI平板培养基上用L型涂布棒均匀涂布(以平板无可见水滴为准)。随后进行抑菌试验样片贴放:每次试验贴放1个染菌平板,每个平板贴放4片试验样片,1片对照样片,共5片。贴放完毕后用无菌镊子轻压样片,使其紧贴于平板表面。盖好平皿,置 36 ℃温箱,厌氧培养3-5 d后观察结果。该试验重复3次。

【评价指标】抑菌环的大小

【结果展示】(展示图片仅供参考,实际实验组别依据合同而定)

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图1 抑菌环大小表型图

【评价结论】

1、抑菌环直径大于7 mm,判为有抑菌作用;3次重复试验(共12个样片)均有抑菌作用,判为合格。

2、本实验初步证实了该供试品具有痤疮丙酸杆菌抑制作用。

【参考文献】

[1]卫生部2002年版《消毒技术规范》-2.1.8.2抑菌环试验

[2]WS/T650-2019 抗菌和抑菌效果评价方法-5.1.4抑菌环试验

[3] 王庆芬;杨育儒;沈秋莲;张荣.枇芩颗粒剂体外抑制金黄色葡萄球菌和痤疮丙酸杆菌的作用.中国现代应用药学,2015(12)

[4]QB/T 2738-2012 日化产品抗菌抑菌效果的评价方法

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